样本的核酸提取：新冠病毒抗原提取保存管

    A、手工核酸提取操作流程（以凯杰的52906柱提法核酸提取试剂盒为例）

 

    （1）裂解液配制：在基因扩增实验室的试剂配制区或单独的普通试剂配制实验室中，准备核酸提取所需的洗液1（AW1）、洗液2（AW2）和carrierRNA。按照要求，分别向洗液1和洗液2中加入分子生物学级别的130ml和160ml的无水乙醇并及时做好标记；取310μl洗脱液（AVE）溶解310μg/支的CarrierRNA。配置好后，通过传递窗进入核酸提取区或由工作人员送入核酸提取专用实验室。

 

    （2）样本裂解：取560μlAVL裂解液到1.5ml无菌EP管中，加入5.6μl配制好的CarrierRNA，再加入已经灭活的140μl样本（例如咽拭子、血浆等），混匀振荡15秒，室温静置10分钟，充分裂解样本中的核酸。将EP管瞬时离心后加入560μl无水乙醇，充分混匀15秒，再次瞬时离心后备用。吸取630μl裂解产物，小心加入至离心柱中，8000rpm（或6000g）离心1分钟，转移离心柱至新收集管，将剩余630μl裂解产物加到离心柱中，重复上一离心操作（若样本体积大于140μl，则在此步骤重复将630μl裂解产物过滤收集在一个离心柱上）。

 

    （3）核酸的洗涤：取500μl洗液1（AW1）至离心柱中，8000rpm（或6000g）离心1分钟；换新收集管后，取500μl洗液2（AW2）至离心柱中，8000rpm（或6000g）离心1分钟；换新收集管后，用14000rpm（或20000g）离心3分钟，去除洗液2（AW2）；换新收集管后，继续用离心机最大转速（20000g）离心1分钟，充分甩离残留的洗液2（AW2）。

 

    （4）核酸的洗脱和回收：取一1.5ml无菌EP管，将离心柱放入其中，加入洗脱液（AVE）40~60μl，室温静置1分钟后，用8000rpm离心1分钟回收核酸，以备PCR检测使用。