PCR体系的配制和模板加样

 

    1.操作流程：新冠病毒抗原提取保存管

 

    在基因扩增实验室的试剂配制区或单独的专用实验室，配制PCR体系。根据试剂盒说明书的要求，将试剂盒的不同组分（一般包括反应液、酶、引物等）按照各自必须的体积量进行配制混合，充分混匀并离心后，通过传递窗传递到核酸提取和加样区，或由专人从试剂配制实验室送至核酸提取和加样专用实验室。在加样专用生物安全柜内，根据检测样本例数分装体系到每个反应管中，逐一将样本核酸加入到对应的反应管中，并加盖密闭好PCR反应管；每批次检测需要做一个阳性对照和3个阴性对照。

    2.要点提示：

 

    ●试剂配制必须严格在试剂配制区或单独、洁净的专用实验室和安全柜内进行，以确保试剂不会有被污染的可能。

 

    ●试剂配制时要根据检测样本数量进行合理配制，每批次检测均需要包括3个阴性对照和1个阳性对照的试剂，同时还需要考虑试剂分配过程中的正常损耗等消耗。

 

    ●加样可以和样本处理/核酸提取在同一分区或同一间实验室进行，但如有条件最好在单独的加样区或至少使用专用安全柜进行加样。

 

    ●体系分装建议每次更换新的吸头，避免反复使用带来体积误差和交叉污染。

 

    ●应配置体系加样登记表，确保加样过程准确无误。

 

    ●PCR密闭管盖应特别谨慎，建议更换新的手套，防止手套等接触管盖内部带入污染的风险。